在制備色譜中,高效液相色譜發展最快, 應用最廣,目前已成為有機化學和生物化學中一項十分重要的分離與純化技術。制備高效液相色譜柱目前可分為空管和壓縮型兩大類。
1. 空管柱
空管柱與分析柱相同,為中空的不銹鋼管。常用空管柱內徑為10-100mm,采用勻漿填充技術填裝10-20μm多孔固定相。隨空管柱直徑的增大,用勻漿法填充高效色譜柱的難度也越來越大,內徑100mm 的空管是目前用勻漿法填充所能得到的高效的最大管狀柱, 內徑大于100mm 的制備柱目前均采用壓縮柱。
2. 壓縮柱
壓縮柱又可分為徑向、軸向及環形膨脹三大類。
(1)徑向壓縮( radial compression) 柱。
填料裝在管壁可壓縮的高聚物柱管內制成柱芯,再將裝有填料的柱芯放入不銹鋼外套中,利用氣體或液體施壓于柱芯外壁和不銹鋼外套之間, 壓緊柱芯內的填料,以消除顆粒間及顆粒與管壁間的空隙。徑向壓縮柱的主要缺點是柱芯長度固定,不如軸向壓縮柱可以任意調節。此外直徑較大的色譜柱中徑向經常出現粒度梯度, 造成流動相徑向流速分布不均勻。由于徑向擴散太慢,不能抵消柱截面積流速差異所產生的濃度梯度,所以徑向流速是峰展寬的一個重要來源。